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hanyu9217

木虫 (正式写手)

[交流] 外植体的灭菌

小弟现在在做一个试验,想得到一批无菌植株,材料是银中杨(一种杨树)的茎短,茎短上有笌蕾,灭菌的时候不方便(灭菌液是酒精和升汞),时间长了,外植体死了,时间短了,灭菌不彻底啊,想问一下,有没有什么好方法对付笌蕾啊 !谢谢了啊
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xiaochong0101

铜虫 (小有名气)

木本植物外植体的处理很麻烦,取材很重要!要取新发出的嫩芽,本身带菌少。
如果是冬季或早春没有萌发时取材,建议取整段枝条,冲洗干净(先用洗涤剂洗,要流水多冲),如果上述方法都不行,建议简单消毒处理后,插到无菌三角瓶,加入无菌水,光下培养,使芽萌发,每天换水。待芽萌发后,取嫩芽表面消毒后培养。
对你说的材料不太了解,不知道是不是适用。
4楼2008-06-11 15:48:04
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wolong1984

银虫 (小有名气)

目前还没听说其他方法,要不你做个时间的梯度,看能不能搞定!
2楼2008-06-08 21:22:41
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realNazi

木虫 (正式写手)

外植体灭菌就是很麻烦的
建议你先用流水冲洗1-2小时
再用3%次氯酸钠预处理(具体时间把握在10-15min)
之后拿到超净工作台用无菌水清洗3到5次每次5分钟
之后用75%酒精处理30s,之后用无菌水清洗数次
再用1%的升汞浸泡5-15分钟(具体时间要做梯度实验找出最优组合)
实验是很简单就是时间费的比较多
学为人师,行为示范
3楼2008-06-09 00:36:14
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

换一种消毒试剂试试,用次氯酸钠再加上一定浓度的吐温20(表面活化剂)
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
5楼2008-06-11 18:32:41
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