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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 液相跑不出峰
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nananlive

银虫 (初入文坛)

[交流] 液相跑不出峰

我做的是聚谷氨酸，过的是C18柱，紫外检测器，磷酸盐缓冲溶液-甲醇做的流动相，可是跑了很多次只在3分钟左右出峰，肯定不是我的那个东西，文献上都是12分钟左右出峰。请各位专家帮忙分析一下是什么原因.多谢啦~~~
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1楼 2008-06-07 10:35:19
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柳成阴

版主 (文坛精英)

小组长
★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢，请继续关注……^_^
怎么可以肯定不是你要的峰？在C18上聚谷氨酸保留很弱，出峰肯定比较早，你用的流动相的配比是多少？文献上的可以参考，保留时间和很多因素有关的。你进一个不保留的样品，如硫脲，看看死时间是多少。看你的聚谷氨酸在该流动相下有没有保留。
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2楼2008-06-07 13:03:36
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wei_wei_1983

木虫 (著名写手)
是不是波长没选对啊？
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我们的药学讨论空间http://kitbar.kilu.de/bbs/?fromuid=4 讨论群70414423
3楼2008-06-07 16:22:53
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫
★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢，请继续关注……^_^
文献只能作为参考,建议流动相变变!特别是流动相的PH值
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是也罢，非也罢，是是非非争个啥。河东河西三十年，对的错啦，错的对拉！得也罢，失也罢，患得患失误年华。凡事该做尽管做，得了更好，失也没啥！
4楼2008-06-07 17:16:24
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jinshanshi88

木虫 (著名写手)
你是完全按照文献做的吗，流动相，波长，柱子，文献只能参考，很多重现不了的
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5楼2008-06-07 18:29:13
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gaohongmei128

金虫 (小有名气)
换低流速或者更换其他流动相试试
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6楼2008-06-07 20:23:49
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nananlive

银虫 (初入文坛)
流动相配比是磷酸盐：甲醇=95：5
选的波长是220nm
所有条件都是按照文献做的，流速是1ml/min
3分钟左右出的峰重现性很好，难道在保留时间是3分钟啊，好短啊
2楼说的进个不保留样品是啥意思？其他条件不变流动相换成硫脲吗？
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7楼2008-06-08 20:36:14
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柳成阴

版主 (文坛精英)

小组长
★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢您的关注……^_^
引用回帖:
Originally posted by nananlive at 2008-6-8 20:36:
流动相配比是磷酸盐：甲醇=95：5
选的波长是220nm
所有条件都是按照文献做的，流速是1ml/min
3分钟左右出的峰重现性很好，难道在保留时间是3分钟啊，好短啊
2楼说的进个不保留样品是啥意思？其他条件不变流动 ...

对于　一个不保留的样品是没法分的。色谱就是利用各个组分在固定相上的保留差异分的。。硫脲的极性很强，反相柱上很难保留（如C18柱），30%乙腈浓度以下可认为没有保留，它的出峰时间就可以认为是死时间。。
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8楼2008-06-09 16:05:37
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nananlive

银虫 (初入文坛)
非常感谢~我去试试！
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9楼2008-06-09 21:00:31
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tjbljh

木虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢你的补充……^_^
我补充点，不是所有柱子都一样的，不同牌子或者同牌子不同批的的C18就差别很大，这个因素也要考虑的，不能只看保留时间
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10楼2008-06-09 23:37:14
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