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[求助]
求助前辈们，最近在做的用土壤试剂盒和机械法提取酒醅基因组，求指点
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主要的实验步骤如下： 1、样品预处理 取5g酒醅样品用15ml无菌0.1mol/LPBS缓冲液悬浮，加入1g石英砂，漩涡震荡5分钟，200g离心5分钟，取上清于另一个离心管中。沉淀用5mlPBS重复上述操作洗涤3次。收集全部上清，12000g离心5分钟，收集沉淀。 2、基因组提取 --生工土壤试剂盒提取 按照试剂盒使用说明书，稍微有点改动  --机械法提取 1）、加入0.4ml破菌缓冲液（曲拉通、SDS、NaCl、Tris.HCl、EDTA）、1g石英砂、0.4ml酚/氯仿，漩涡震荡后加入0.4ml无菌水，快速震荡后高速离心； 2）、取上清，分别依次用酚、酚/氯仿、氯仿抽提，每次抽提完高速离心取上清。 3）、1ml无水乙醇沉淀，高速离心后弃上清，无菌水溶解。  三个样分别是酒醅上中下层，其他人用的机械法效果都挺好的，我重复做了好多次都是这样，不知道为何提取不出基因组，前辈们帮我分析分析吧，我是新手，很多还不懂，希望多多指教！ |
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2楼2015-01-23 22:37:03
