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glenn_007木虫 (小有名气)
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[交流]
紧急求助：克隆蓝白斑实验出现假阳性！！！
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各位大侠，请帮帮忙，我先遇到一些奇怪的现象，不知如何改进： 我的目标片段是600—700bp，T载体链接后，转化克隆，然后蓝白斑实验筛选。挑出白色colony，摇菌，最后制备质粒。 但是送去测序的样片却显示全部是载体序列。重复了很多次，也都是这样的结果，我现在制备质粒之前，直接做PCR，结果显示也没有目标片段的扩增。这与测序的结果一致，证明里面并没有插入片段。但是蓝白斑实验明明是有白色的colony啊，虽然少了一点，但是与蓝斑对比，确实是白色的很明显。 我不知道是哪里出了问题。请大家帮帮我？ |
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