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ginnyzhuzhu

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组质粒转到BL21(DE3)中用T7检测没条带,用特异引物检测有条带,怎么回事已有5人参与

在做原核表达,构建的重组质粒pET-32a-L,双酶切大小正确,重组质粒用T7还有特异性引物检测都正确!但是转化到BL21(DE3)的时候长了满板的菌,挑了十个菌,用T7检测没有一个有条带,但是用特异引物检测都有,到底哪里出了问题????后面换了别人做的感受态转化,结果两个板只长了一颗菌,怎么破?求各位大神指点,小女子不胜感激
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残剑流霜

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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ginnyzhuzhu: 金币+2, 有帮助 2015-01-21 11:09:48
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:15:55
BL21是可以提质粒的,你直接提个质粒再酶切试一下看看,切得出来条带大小正确就应该没啥问题
11楼2015-01-21 11:06:35
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