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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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[交流] 营养琼脂颗粒培养基说明

营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基
【货号、规格、产品形态及包装形式】
【用途】

  用于细菌总数测定、纯培养及保存菌种,也可用于消毒效果测定。

  【检验原理】

  蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

  【配方成分】

配方(每升)  含量

蛋白胨    10g

牛肉膏粉     3g

氯化钠  5g

琼脂  15g

最终pH 7.3±0.2
  【使用方法】

  1、 称取本品33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。

  2、 (食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。依次做1:100,1:1000……稀释液。

  3、 根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。

  4、 稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

  5、 观察结果。

  6、 菌落计数方法:

  做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

  7、 菌落计数的报告:

  选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计。

  A:稀释度的选择:

  应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之。

  若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30—300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2,则应报告其平均数;若大于2则报告其较小的数字。

  若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

  若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

  若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最底稀释倍数报告之。

  若有稀释度的平均菌菌落数均不在30—300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

  来源:营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基
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