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gdhuankai

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[交流] 营养琼脂颗粒培养基说明

营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基
【货号、规格、产品形态及包装形式】
【用途】

　　用于细菌总数测定、纯培养及保存菌种，也可用于消毒效果测定。

　　【检验原理】

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

　　【配方成分】

配方（每升）  含量

蛋白胨 10g

牛肉膏粉    3g

氯化钠  5g

琼脂  15g

最终pH 7.3±0.2
　　【使用方法】

　　1、称取本品33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

　　2、 (食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。依次做1：100，1：1000……稀释液。

　　3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

　　4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

　　5、观察结果。

　　6、菌落计数方法：

　　做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

　　7、菌落计数的报告：

　　选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计。

　　A：稀释度的选择：

　　应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。

　　若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30—300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，则应报告其平均数;若大于2则报告其较小的数字。

　　若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

　　若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

　　若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最底稀释倍数报告之。

　　若有稀释度的平均菌菌落数均不在30—300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

　　来源：营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基

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