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supersky3195银虫 (小有名气)
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[求助]
半定量一个组织PCR做不出来，求助已有4人参与
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我是做3个组织的半定量，浓度开始很高，在500ng左右，在500ng浓度时（是有些高），A和B组织的内参和目的基因都能跑出来，C组织跑不出来，之后我就稀释，并做了梯度，A和B 也都能跑出来，但是C却跑不出来。我把初始浓度的模板跑了块胶，都有亮带，且C的最亮，将三个组织跑了内参并且跑胶，也是能检测出来，但为什么做半定量时C却一直跑不出来。C组织我一共做了500ng,100ng,50ng,25ng的，都不理想，低浓度下只有零星的几个能跑出来，但CT 较高，请问各位高手大侠，小弟真是有些没办法了，是否需要将原模板用试剂盒纯化下？ |
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supersky3195
银虫 (小有名气)
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12楼2015-01-16 15:25:59
cicelyzh
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2楼2015-01-15 08:34:47
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4楼2015-01-15 13:37:05