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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 金纳米粒子吸附DNA操作顺序
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梦回年少

木虫 (正式写手)

[求助] 金纳米粒子吸附DNA操作顺序 已有2人参与

各位虫友：
    我在做金纳米粒子上以poly A为锚，吸附DNA，但对加料顺序不是很确定，现在做的是金纳米溶液和DNA混，孵育后，再加PBS（不含NaCl），再孵育一段时间，并逐步加浓的NaCl溶液至所需浓度。但从紫外上看吸收峰峰强会降低很多。是不是加料顺序有问题？各位都是怎么操作的呢？金纳米在溶液中稳定存在、且DNA吸附效果较好的的NaCl浓度是多少呢？DNA吸附量降低是否要相应降低NaCl的浓度？
    还有就是想问一下大家，吸收峰位置的变化到底是由粒径变化导致的，还是吸附后介电常数发生变化导致的，或者两者兼而有之？
    老师也没做过这块，希望各位做这个方向的虫友帮帮忙，先谢谢大家了~
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1楼 2015-01-13 21:26:31
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wsy_0911

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
梦回年少: 金币+1 2015-01-17 13:24:19
先加过量DNA，再加酸到样品，有文献说 PH=3的时候DNA吸附很快只要10分钟，30分钟后调回PH，然后就可以逐步加NaCI, 50 mM一步一步加， 可以加到700mM.

去年底我刚做过这个
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13楼2015-01-16 21:14:34
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
50~60 mM NaCl 可以吸附得比较好。把DNA先加到盐溶液里，再加纳米金。
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2楼2015-01-14 21:57:11
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梦回年少

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2015-01-14 21:57:11
50~60 mM NaCl 可以吸附得比较好。把DNA先加到盐溶液里，再加纳米金。

谢谢~我看文献里是可以做到300mM重悬的，也有说是先加完PBS（不含NaCl），之后逐步加盐的，说是屏蔽电荷，降低DNA间的静电排斥，可以使吸附量增大。您说50~60 mM可以吸附的很好，那吸附量是足够大的么？DNA加到盐溶液里是一步都加进去？
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3楼2015-01-15 15:55:59
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
梦回年少: 金币+5 2015-01-15 21:32:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦回年少 at 2015-01-15 15:55:59
谢谢~我看文献里是可以做到300mM重悬的，也有说是先加完PBS（不含NaCl），之后逐步加盐的，说是屏蔽电荷，降低DNA间的静电排斥，可以使吸附量增大。您说50~60 mM可以吸附的很好，那吸附量是足够大的么？DNA加到盐溶 ...

其实吸附过程影响因素很多，DNA的长度、纳米金的大小、溶液的pH都会造成影响。据我所知，如果是用氯金酸和柠檬酸合成的纳米金，粒径大小在13nm左右，DNA的长度为12-mer，pH 7.6，在这种条件下，50~60 mM NaCl基本就吸附饱和了。pH越低、盐浓度越高，吸附越容易。DNA越长吸附越慢，但吸附后解吸也越难。
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4楼2015-01-15 18:42:58
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