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liuli124125

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助:怎么检测RT产物的质量

各位高手,谁知道在做PCR之前想检测一下RT是否成功,可以用什么方法呀。急待回复,先谢过了
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yangym1123

木虫 (小有名气)

用内参基因即管家基因扩增RT产物看效果!如果得到大小和预期一致并且亮度均一的条带,说明RT还可以哦!个人建议!
2楼2008-06-02 12:11:12
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Kiddy

金虫 (小有名气)

同意楼上!
3楼2008-06-02 16:46:30
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liuli124125

铜虫 (初入文坛)

我用的是两步法进行RT-PCR,没得到想要的结果,想看看到底是反转就没转成功还是后面的PCR条件不对,但不知道cDNA能用凝胶电泳检测出来不。
4楼2008-06-03 16:32:14
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donna181

金虫 (小有名气)

同意二楼的观点,应该说用内参基因引物,以反转录产物作为模板进行PCR,得到的条带和亮度与预期一致,就说明你的模板没有问题,可以进行下一步的目的基因扩增.如果你的内参基因的亮度很高,反转录产物可以进行必要倍数的稀释,比如5倍,10倍,再进行目的基因的扩增,也是没有问题的.
5楼2008-06-04 09:57:19
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donna181

金虫 (小有名气)

再补充一点就是:没有必要进行电泳了
6楼2008-06-04 09:58:27
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liuli124125

铜虫 (初入文坛)

谢谢各位的答复了
7楼2008-06-05 23:16:33
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xiaricha

银虫 (小有名气)

内参基因引物怎么设计啊?没接触过啊
8楼2008-06-09 21:13:04
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