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病毒浓度
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请问大侠，两个病毒分别是双分体病毒属和维多利亚病毒属，都是球状病毒， 1病毒提取后，测定出A260/A280为1.33和1.24，请问如何得知病毒的浓度呢？ 2是仪器上显示的2.65mg/ml和6.05mg/ml么，还是仪器上显示的是蛋白浓度呢？ 3多少浓度可以用来拍电镜？ 4是否要用别的实验来验证它们是目的病毒，用反转录么？ 5拍完电镜，还能用来做侵染么？ 6提完保存在哪里比较好呢？4度还是-80？用加其他试剂么？ 回答任意一条都会答谢的，求帮助~~~ |
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WQS1991
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lqf808: 金币+2, 谢谢应助 2015-01-26 07:12:47
lqf808: 金币+2, 谢谢应助 2015-01-26 07:12:47
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RNA病毒的话，简单一点可以做个RT，要是目的病毒量比较少就来了qRT,接着跑胶看看，有相似的大小条带，想精确点测个序也行，我记得NARKER相应条带也有代表相应的目的条带浓度大小吧，还得看具体的marker。也可以直接跑个RNA胶，不过需要特别注意不要污染了。之前做手足口病还有呼吸道病毒的时候是在这么干的，不知道适不适合你的实验。至于A260/A280的比值，不可全信，有时候RNA降解了单靠这个比值也不能完全反映。过夜或者长期的话最好-80，暂时保存4度就好，但时间不要太长以免降解，至于加什么，我是没加，不知道你的那些病毒需不需要加，最好查查哈。电镜的话，没做过，不好意思这个就不太清楚了。希望大家能交流交流哦 |
4楼2015-01-25 22:01:00
5楼2015-10-20 10:36:09
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其实可以从病毒中提取核酸来跑电泳图尝试一下吧？我跑蛋白电泳肉眼可见一条带的时候就送去拍电镜了，但是一个视野内只有两三个粒子。4不懂5，你可以拍电镜之前就分装，无菌的可以做转染。6加百分之5到10的DMSO，存于负八十度。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2020-01-09 00:15:59