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山脚下的喵

新虫 (小有名气)

[求助] 病毒浓度

请问大侠,两个病毒分别是双分体病毒属和维多利亚病毒属,都是球状病毒,
1病毒提取后,测定出A260/A280为1.33和1.24,请问如何得知病毒的浓度呢?
2是仪器上显示的2.65mg/ml和6.05mg/ml么,还是仪器上显示的是蛋白浓度呢?
3多少浓度可以用来拍电镜?
4是否要用别的实验来验证它们是目的病毒,用反转录么?
5拍完电镜,还能用来做侵染么?
6提完保存在哪里比较好呢?4度还是-80?用加其他试剂么?
回答任意一条都会答谢的,求帮助~~~
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高山自有方便路,远水自有渡河人?
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WQS1991

银虫 (正式写手)

这……农林板块上估计没人回答,发到别的地方吧
2楼2015-01-18 10:25:05
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山脚下的喵

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by WQS1991 at 2015-01-18 10:25:05
这……农林板块上估计没人回答,发到别的地方吧

谢谢~只能感叹我连基本常识都没有。
高山自有方便路,远水自有渡河人?
3楼2015-01-20 21:05:19
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ivirus

金虫 (正式写手)

★ ★
lqf808: 金币+2, 谢谢应助 2015-01-26 07:12:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by 山脚下的喵 at 2015-01-20 21:05:19
谢谢~只能感叹我连基本常识都没有。...

RNA病毒的话,简单一点可以做个RT,要是目的病毒量比较少就来了qRT,接着跑胶看看,有相似的大小条带,想精确点测个序也行,我记得NARKER相应条带也有代表相应的目的条带浓度大小吧,还得看具体的marker。也可以直接跑个RNA胶,不过需要特别注意不要污染了。之前做手足口病还有呼吸道病毒的时候是在这么干的,不知道适不适合你的实验。至于A260/A280的比值,不可全信,有时候RNA降解了单靠这个比值也不能完全反映。过夜或者长期的话最好-80,暂时保存4度就好,但时间不要太长以免降解,至于加什么,我是没加,不知道你的那些病毒需不需要加,最好查查哈。电镜的话,没做过,不好意思这个就不太清楚了。希望大家能交流交流哦
奔三的年纪 想换个环境
4楼2015-01-25 22:01:00
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李想飘

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ivirus at 2015-01-25 22:01:00
RNA病毒的话,简单一点可以做个RT,要是目的病毒量比较少就来了qRT,接着跑胶看看,有相似的大小条带,想精确点测个序也行,我记得NARKER相应条带也有代表相应的目的条带浓度大小吧,还得看具体的marker。也可以直接 ...

我也在做呼吸道病毒,研一,能留个联系方式不?
5楼2015-10-20 10:36:09
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小二呀

铁虫 (初入文坛)

其实可以从病毒中提取核酸来跑电泳图尝试一下吧?我跑蛋白电泳肉眼可见一条带的时候就送去拍电镜了,但是一个视野内只有两三个粒子。4不懂5,你可以拍电镜之前就分装,无菌的可以做转染。6加百分之5到10的DMSO,存于负八十度。

发自小木虫Android客户端
6楼2020-01-09 00:15:59
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