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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量时ct值40以后还没起峰但有溶解曲线 是什么原因？
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lxl0708

铜虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量时ct值40以后还没起峰但有溶解曲线 是什么原因？ 已有17人参与

荧光定量时目的基因ct值40以后还没起峰但有溶解曲线 是什么原因？怎么处理呀， 内参正常
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1楼 2015-01-06 21:43:44
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GJT0427gjt

新虫 (初入文坛)
以我做实时定量的经验，你应该验证一下这对引物的特异性，引物特异性不好，溶解曲线也不好。你的循环应该设置在45个左右。也有可能加错样了，但是平行对照都不起峰的话，应该是引物的问题
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13楼2015-09-12 20:10:42
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xiaoyugutou

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-07 16:44:56
Double check your target gene primer, if it is OK, maybe your target gene has a really low expression abundance.
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2楼2015-01-07 06:03:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-07 16:45:00
目的基因量太少，你确定溶解曲线的峰不是引物二聚体吗？
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3楼2015-01-07 08:53:33
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sicilia189

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果引物设计没有问题的话，应该是目的基因表达量过低。
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4楼2015-01-15 00:03:59
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