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凝胶回收出了问题,请高手指导!谢谢
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jon0901327
新虫
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虫号: 551578
注册: 2008-04-27
[交流]
凝胶回收出了问题,请高手指导!谢谢
我在凝胶回收时候出了问题:用试剂盒回收了三次都没回收回来,我是严格按照说明书进行的,请高手指导!不胜感激!
胶回收时条带非常清晰,按照试剂盒说明书进行回收,回收完后,我将回收产物再次凝胶电泳检测,可是没有条带,我已经做了三次,每次结果都一样,我真不知道问题出在了哪里,请高手教我!
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1楼
2008-05-30 12:10:06
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tangtl
木虫
(正式写手)
小木虫潜水者
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帖子: 370
在线: 22.5小时
虫号: 423004
注册: 2007-07-21
性别: GG
专业: 化学环境污染与健康
你跑胶浓度多大?加大溶胶液的量。我怀疑你超过100ul
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12楼
2008-09-08 22:31:37
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weiwei1
木虫
(小有名气)
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虫号: 301060
注册: 2006-11-26
专业: 中医方剂
试剂盒不好,换别的牌子的
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2楼
2008-05-30 12:58:48
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月月大可
木虫
(著名写手)
BioEPI: 2
应助: 13
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金币: 3272.1
散金: 1393
红花: 17
帖子: 1674
在线: 295.7小时
虫号: 549127
注册: 2008-04-20
性别: GG
专业: 生物化学
问下一,洗脱DNA你用的是什么?试剂盒中的TE还是超纯水?如果是超纯水一定注意超纯水的pH,pH低了洗脱效果很不好
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3楼
2008-05-30 13:43:34
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jon0901327
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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帖子: 24
在线: 5分钟
虫号: 551578
注册: 2008-04-27
我用的是新长江的试剂盒
洗脱DNA时,用的试剂盒自带的洗脱液EB(Eluent buffer)
操作步骤按照说明书进行
真是做了一点修改:
修改一:胶融化后,我让融化的胶冷却到室温后上柱子(试剂盒上没说要冷却,我是参考的其它一些试剂盒说明书做的修改)
修改二:每次上柱子后,我都让它室温静止3分钟,然后离心(试剂盒上没说是否静止)
修改三:离心的时候我是在25摄氏度下离心(试剂盒上没说温度)
请各位老师、师兄师姐们赐教!
谢谢!
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4楼
2008-05-30 14:02:13
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