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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 凝胶回收出了问题，请高手指导！谢谢
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jon0901327

新虫 (初入文坛)

[交流] 凝胶回收出了问题，请高手指导！谢谢

我在凝胶回收时候出了问题：用试剂盒回收了三次都没回收回来，我是严格按照说明书进行的，请高手指导！不胜感激！

胶回收时条带非常清晰，按照试剂盒说明书进行回收，回收完后，我将回收产物再次凝胶电泳检测，可是没有条带，我已经做了三次，每次结果都一样，我真不知道问题出在了哪里，请高手教我！
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1楼 2008-05-30 12:10:06
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weiwei1

木虫 (小有名气)
试剂盒不好,换别的牌子的
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2楼2008-05-30 12:58:48
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月月大可

木虫 (著名写手)
问下一，洗脱DNA你用的是什么?试剂盒中的TE还是超纯水？如果是超纯水一定注意超纯水的pH，pH低了洗脱效果很不好
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3楼2008-05-30 13:43:34
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jon0901327

新虫 (初入文坛)
我用的是新长江的试剂盒
洗脱DNA时，用的试剂盒自带的洗脱液EB（Eluent buffer)
操作步骤按照说明书进行
真是做了一点修改：
修改一：胶融化后，我让融化的胶冷却到室温后上柱子（试剂盒上没说要冷却，我是参考的其它一些试剂盒说明书做的修改）
修改二：每次上柱子后，我都让它室温静止3分钟，然后离心（试剂盒上没说是否静止）
修改三：离心的时候我是在25摄氏度下离心（试剂盒上没说温度）

请各位老师、师兄师姐们赐教！
谢谢！
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4楼2008-05-30 14:02:13
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jerome711

银虫 (小有名气)
给你一个简单的建议，借别人的柱子回收一下。
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做懂得生活的人
5楼2008-06-02 10:18:24
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humants

金虫 (正式写手)
这个问题已经有人问了，你看一下下面的回答，对你因该有帮助！祝你好运...
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=838608
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6楼2008-06-02 21:18:54
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taishuai2004

你的片段有多大啊 太小和太大 都不好回收
溶解液提前加热一下 效果会很好的
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7楼2008-06-03 08:49:57
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hulqi

金虫 (正式写手)
换盒子，应该是试剂盒的问题～
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8楼2008-06-04 00:51:33
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thesea3983

铁虫 (小有名气)
浓缩漂洗液是不是没加无水乙醇啊！按1：3比例加！不加就回收不回来了！
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9楼2008-09-08 14:38:09
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十比

木虫 (著名写手)
后面的洗脱在室温下离心可能好些, 最后一步的洗脱液你在65左右预热一下看看.
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10楼2008-09-08 19:20:30
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