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jon0901327

新虫 (初入文坛)

[交流] 凝胶回收出了问题,请高手指导!谢谢

我在凝胶回收时候出了问题:用试剂盒回收了三次都没回收回来,我是严格按照说明书进行的,请高手指导!不胜感激!

胶回收时条带非常清晰,按照试剂盒说明书进行回收,回收完后,我将回收产物再次凝胶电泳检测,可是没有条带,我已经做了三次,每次结果都一样,我真不知道问题出在了哪里,请高手教我!
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weiwei1

木虫 (小有名气)

试剂盒不好,换别的牌子的
2楼2008-05-30 12:58:48
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月月大可

木虫 (著名写手)

问下一,洗脱DNA你用的是什么?试剂盒中的TE还是超纯水?如果是超纯水一定注意超纯水的pH,pH低了洗脱效果很不好
3楼2008-05-30 13:43:34
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jon0901327

新虫 (初入文坛)

我用的是新长江的试剂盒
洗脱DNA时,用的试剂盒自带的洗脱液EB(Eluent buffer)
操作步骤按照说明书进行
真是做了一点修改:
修改一:胶融化后,我让融化的胶冷却到室温后上柱子(试剂盒上没说要冷却,我是参考的其它一些试剂盒说明书做的修改)
修改二:每次上柱子后,我都让它室温静止3分钟,然后离心(试剂盒上没说是否静止)
修改三:离心的时候我是在25摄氏度下离心(试剂盒上没说温度)

请各位老师、师兄师姐们赐教!
谢谢!
4楼2008-05-30 14:02:13
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jerome711

银虫 (小有名气)

给你一个简单的建议,借别人的柱子回收一下。
做懂得生活的人
5楼2008-06-02 10:18:24
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humants

金虫 (正式写手)

这个问题已经有人问了,你看一下下面的回答,对你因该有帮助!祝你好运...
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=838608
6楼2008-06-02 21:18:54
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taishuai2004

你的片段有多大啊 太小和太大 都不好回收
溶解液提前加热一下 效果会很好的
7楼2008-06-03 08:49:57
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hulqi

金虫 (正式写手)

换盒子,应该是试剂盒的问题~
8楼2008-06-04 00:51:33
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thesea3983

铁虫 (小有名气)

浓缩漂洗液是不是没加无水乙醇啊!按1:3比例加!不加就回收不回来了!
9楼2008-09-08 14:38:09
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十比

木虫 (著名写手)

后面的洗脱在室温下离心可能好些, 最后一步的洗脱液你在65左右预热一下看看.
10楼2008-09-08 19:20:30
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