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wangtao89hf

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[交流] EMSA——我的复合物在PAGE胶的点样孔不进胶怎么解决已有2人参与

我做的是蛋白质和DNA的结合实验，游离的DNA的进胶了，但是蛋白质与我的DNA结合的复合物在PAGE的点样孔不进胶。同时做的牛血清白蛋白和DNA的对照，DNA也进胶，但是投稿编辑认为复合物不进胶不是直接证据说明不了问题！求高手，我怀疑是因为我的蛋白质PI=11.56造成的，有什么办法解决吗？

图片1.jpg

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1楼 2015-01-05 22:05:27

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fuyuandj86

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-06 09:08:01

不进胶确实不能说明问题，我是审稿人我也不放
你这蛋白等电点确实高，你把AFE2726和牛血清蛋白一起加试验下，有时候牛血清蛋白能帮助另外一个进胶
再检查一下你的蛋白是不是稳定，如果在胶孔都沉淀了当然进不去胶

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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.

2楼2015-01-06 00:59:38

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wangtao89hf

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2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-01-06 00:59:38
不进胶确实不能说明问题，我是审稿人我也不放
你这蛋白等电点确实高，你把AFE2726和牛血清蛋白一起加试验下，有时候牛血清蛋白能帮助另外一个进胶
再检查一下你的蛋白是不是稳定，如果在胶孔都沉淀了当然进不去胶

你觉得我把DNA做重复叠加，延长DNA的长度使得复合物的整体带负电能不能带动复合物向下移动？

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3楼2015-01-06 15:22:05

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