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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于质粒提取
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bao86

铁虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒提取

用Omega 质粒提取试剂盒提质粒时，washingbuffer 里忘了加乙醇而直接进行洗脱了，然后又加了加有乙醇的washingbuffer ，最后跑电泳发现没有任何条带。是不是用没加乙醇的washingbuffer时，我的质粒都被洗脱下去了？
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1楼 2008-05-28 11:04:25
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bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓
是这样的！没有加乙醇，washing buffer 就会溶解DNA，在洗脱时就已经在脱落了！
    这种情况下，你可以再把第一次的洗头液中，加入无水乙醇，充分混匀后，再重复洗脱！
   另外，也要考虑你质粒的拷贝数和大小，拷贝数太低、片段太大的话，试剂盒也很难提的！
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2楼2008-05-28 11:22:59
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bao86

铁虫 (小有名气)
我后来测了下被没加乙醇的washingbuffer洗脱下来的溶液的DNA浓度，果然都被洗脱下来了！
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3楼2008-05-28 16:56:28
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