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bao86

铁虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒提取

用Omega 质粒提取试剂盒提质粒时,washingbuffer 里忘了加乙醇而直接进行洗脱了,然后又加了加有乙醇的washingbuffer ,最后跑电泳发现没有任何条带。是不是用没加乙醇的washingbuffer时,我的质粒都被洗脱下去了?
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bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓

是这样的!没有加乙醇,washing buffer 就会溶解DNA,在洗脱时就已经在脱落了!
    这种情况下,你可以再把第一次的洗头液中,加入无水乙醇,充分混匀后,再重复洗脱!
   另外,也要考虑你质粒的拷贝数和大小,拷贝数太低、片段太大的话,试剂盒也很难提的!
2楼2008-05-28 11:22:59
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bao86

铁虫 (小有名气)

我后来测了下被没加乙醇的washingbuffer洗脱下来的溶液的DNA浓度,果然都被洗脱下来了!
3楼2008-05-28 16:56:28
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