24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3249  |  回复: 24

曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by molizerd at 2015-01-12 17:29:49
加大模板量,换更好的反应buffer.摸索更好的退火温度。话说你引物加这么多?二聚体好亮,一般情况下我25体系加0.3。

那还得看你配的引物的浓度吧。。。。
21楼2015-01-13 16:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:07:27
还是pfu的问题,普通PCR不建议使用,可能会使模板引物降解或者使扩增出来的新模板链降解,如果担心普通的Taq酶扩增不出结果的话,可以使用热启动Taq酶 http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
热启动Taq酶 特异性灵敏度均高于普通的Taq酶
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
22楼2015-01-13 17:09:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

molizerd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2015-01-13 16:50:58
那还得看你配的引物的浓度吧。。。。...

嗯。我一般就按华大或者生工给的单子上的那个稀释。。但是不管神马浓度。。楼主的图二聚体都这么亮。。不太合适啊。。

[ 发自小木虫客户端 ]
23楼2015-01-13 17:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼舞流苏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
23楼: Originally posted by molizerd at 2015-01-13 17:36:58
嗯。我一般就按华大或者生工给的单子上的那个稀释。。但是不管神马浓度。。楼主的图二聚体都这么亮。。不太合适啊。。
...

那也有可能他把引物浓度加的高了,或者cDNA含量低了,剩下的引物没有与底物结合全成二聚体了。。
24楼2015-01-14 13:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

molizerd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
24楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2015-01-14 13:17:16
那也有可能他把引物浓度加的高了,或者cDNA含量低了,剩下的引物没有与底物结合全成二聚体了。。...

嗯。。所以说加大模板量降低引物量啦。。不过有同学说点样孔很亮是因为模板多了。。这个就分不清啦。

[ 发自小木虫客户端 ]
25楼2015-01-14 13:46:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tianti_121 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] (调剂)一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 7/350 2026-04-05 22:31 by dongzh2009
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 9/450 2026-04-05 22:24 by dongzh2009
[考研] 307分材料专业求调剂 +7 Hll胡 2026-04-05 7/350 2026-04-05 18:47 by 无际的草原
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +11 qf626 2026-04-01 11/550 2026-04-05 17:35 by Ecowxq666!
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 323分(计算机视觉和大模型项目)能直接上手 +3 chaoxiicy 2026-04-01 3/150 2026-04-05 00:50 by chongya
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +11 努力奋斗112 2026-04-04 11/550 2026-04-04 20:51 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[论文投稿] 求文献 5+3 ys879651$ 2026-04-02 3/150 2026-04-04 17:22 by bobvan
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 一志愿华东理工大学,080500学硕,317分,求调剂 +13 s1145 2026-03-31 15/750 2026-04-03 11:44 by msi123
[考研] 286求调剂 +7 Faune 2026-03-30 7/350 2026-04-03 10:14 by linyelide
[考研] 初试301,代码085701环境工程,本硕一致,四六级已过,有二区一作,共发表5篇论文 +6 axibli 2026-04-01 6/300 2026-04-02 13:42 by Ecowxq666!
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
信息提示
请填处理意见