应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于菌液PCR的问题
51/1返回列表
查看: 590  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 superarm 的 2 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

superarm

金虫 (正式写手)

[交流] 关于菌液PCR的问题

最近左TA克隆，大概有3-4kb的片断，菌液PCR结果在3kb多处有两条带，挨着比较近，条带不浓。不知道是不是假阳性，载体大小为3000bp。用通用引物T7和SP6扩增，会不会引物自自己扩增空载体的产物？

[ Last edited by superarm on 2008-5-27 at 20:59 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋！
1楼 2008-05-27 20:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rinp

木虫 (正式写手)
最简单的办法就是去测下序了，哈哈
赞一下 回复此楼
海到无边天做岸山登绝顶我为峰.博士学位就是鞋里的一粒米，不拿不舒服，拿了不能吃！
5楼2008-05-28 10:24:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓
★ ★
lixiaoyi1981(金币+2,VIP+0):谢谢，分析合理
可以，你说的这种情况会发生！
      在外源和载体差不多大时，PCR扩增就比较难判断了。建议用载体和外源连接后形成的序列中只有一酶切位点的酶切个连接后的载体，也就是这个位点要么在载体上，要么在外源上，只有一个位点，切个形成的线状DNA电泳检测，大小符合就可以了!
     就算外源不知道的情况下，选用多酶切位点的进行单酶切也可以！
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-05-27 23:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superarm

金虫 (正式写手)
那有两条带，应该有一个是特异性扩增吧？以此是不是能判断片断连入了呢？做酶切有点麻烦，而且成本太高。
赞一下 回复此楼
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋！
3楼2008-05-28 00:07:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouyj

木虫 (正式写手)
可以将有两条带的提质粒酶切验证一下
赞一下 回复此楼
有朋友们的支持，在学术道路上才不会寂寞
4楼2008-05-28 09:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6PrO1XyZ5URF 2026-11-13 3/150 2026-11-15 16:23 by 0aDbZAghdVq9
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:19 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 07:56 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 4/200 2026-11-15 07:01 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:33 by xSrQNSSjcgoX
[基金申请] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 04:16 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-15 00:24 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 8/400 2026-11-14 22:51 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-14 22:39 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-14 22:04 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +6 锦鲤送福至 2026-11-10 6/300 2026-11-14 21:23 by xupeii
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-13 11:04 by Equinoxhua
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 16:55 by zzy933268
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:31 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:03 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭