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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [求助] TA克隆
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humants

金虫 (正式写手)

[交流] [求助] TA克隆

各位师兄师姐，我打算做TA克隆，但是胶回收的PCR片段已经放了十天了，还能用来连接么？效率怎么样？
希望得到你们的解答！谢谢...
注：我用的是rTaq。
[search]TA克隆[/search]
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1楼 2008-05-27 19:24:29
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dearmarie

铁虫 (初入文坛)
★
humants(金币+1,VIP+0):谢谢虫友，我一进连上了。
如果你是—20保存的话应该没什么问题，不放心的话就再加个A尾，但应该不用加，直接连即可。
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2楼2008-05-27 20:04:38
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superarm

金虫 (正式写手)
★
humants(金币+1,VIP+0):谢谢了，我已经克隆成功了
放20度肯定没有问题，4度也应该问题不大，直接克隆吧。祝你好运
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与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋！
3楼2008-05-27 20:48:48
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
humants(金币+1,VIP+0):谢谢虫友，我一进连上了。
我的在－20也放过10几天，然后TA克隆，能出来转化子。TA克隆成功率比较高
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4楼2008-05-28 10:55:33
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liumikewolf

金虫 (小有名气)
不用担心，没有问题
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5楼2008-05-28 11:26:23
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playboy723

金虫 (正式写手)
★
humants(金币+1,VIP+0):谢谢你的建议。
呵呵  应该没问题  但你用的是rTaq酶   这个估计不行   错赔率太高了  即使连上了也会不能用的  建议用高保真酶扩完再连
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6楼2008-05-28 19:26:37
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dk83078

新虫 (初入文坛)

我

楼上可以询问一下，为什么必须用高保真的酶，普通可以吗？
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7楼2008-05-31 13:34:24
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taishuai2004

片段小的话完全可以，长了就不准了
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8楼2008-06-01 14:13:28
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
★
humants(金币+1,VIP+0):谢谢 6-15 11:26
其实最好还是用ETAG酶扩增了再连~~~保稳嘛
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9楼2009-05-18 20:41:10
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