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humants

金虫 (正式写手)

[交流] [求助] TA克隆

各位师兄师姐,我打算做TA克隆,但是胶回收的PCR片段已经放了十天了,还能用来连接么?效率怎么样?
希望得到你们的解答!谢谢...
注:我用的是rTaq。
[search]TA克隆[/search]
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dearmarie

铁虫 (初入文坛)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢虫友,我一进连上了。
如果你是—20保存的话应该没什么问题,不放心的话就再加个A尾,但应该不用加,直接连即可。
2楼2008-05-27 20:04:38
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superarm

金虫 (正式写手)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢了,我已经克隆成功了
放20度肯定没有问题,4度也应该问题不大,直接克隆吧。祝你好运
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋!
3楼2008-05-27 20:48:48
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月月大可

木虫 (著名写手)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢虫友,我一进连上了。
我的在-20也放过10几天,然后TA克隆,能出来转化子。TA克隆成功率比较高
4楼2008-05-28 10:55:33
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

不用担心,没有问题
5楼2008-05-28 11:26:23
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playboy723

金虫 (正式写手)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢你的建议。
呵呵  应该没问题  但你用的是rTaq酶   这个估计不行   错赔率太高了  即使连上了也会不能用的  建议用高保真酶扩完再连
6楼2008-05-28 19:26:37
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dk83078

新虫 (初入文坛)

楼上可以询问一下,为什么必须用高保真的酶,普通可以吗?
7楼2008-05-31 13:34:24
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taishuai2004

片段小的话完全可以,长了就不准了
8楼2008-06-01 14:13:28
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢 6-15 11:26
其实最好还是用ETAG酶扩增了再连~~~保稳嘛
9楼2009-05-18 20:41:10
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