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[求助]waters carbohydrate analysis 柱分析糊精水解液
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常用乳粉中糊精的检测方法为样品除去蛋白质后，用乙醇溶液除去可溶性糖，麦芽多糖沉淀用水溶解后再加入盐酸进行水解，利用水解产物葡萄糖使费林试剂发生颜色变化，采用滴定法测定葡萄糖的含量，再通过换算得到乳粉中糊精的量. 滴定法中影响最终测定结果精确性因素很多，包括反应液碱度、加热沸腾时间，滴定时间等,而LC分析具有定量精确等优点，可以避免上述误差的产生，采用LC辅助验证常用糊精检测方法中条件如何改变，才使最终滴定结果更接近于真实值，摸索得到一个适合推广的优化检测方法。 由已有LC分析结果发现，糊精水解后采用NaOH溶液中和后产生的NaCl，对葡萄糖出峰影响很大，在LC分离过程，二者分离度不佳，峰形严重拖尾。实验过程主要是摸索合适的LC条件将二者分离。 液相条件:Waters 2414示差折光检测器；Waters Carbohydrate analysis column (WATO44355,4.6×250mm,4μm)。流速1.5mL/min；柱温40℃；RID检测器灵敏度32，温度40℃。 问题:我采用80%和90%乙腈作为流动相发现,进样液是NaCl溶液,除了水峰,还有NaCl峰且峰形严重拖尾, 我问过老师,他说NaCl应该不出峰,不明白为什么出了盐峰? 进样为葡萄糖和NaCl混合液时,葡萄糖和NaCl二者分离度极为不佳,为什么? 有什么好的建议分离二者? |
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