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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 考马斯亮蓝法检测出蛋白质含量很低，而用凯氏定氮法测出总氮很高
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恒河夕阳梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zj风之子 at 2014-12-23 13:31:11
醇溶蛋白不溶于水。。可溶于50%~90%的乙醇溶液，你测量到的蛋白质是玉米中能够溶于水的那部分可溶性蛋白。资料很多，书籍、文献都有，具体的你可以到网上搜一下关于蛋白质方面的资料。...

考马斯亮蓝测的应该是能够溶于水的可溶性蛋白。凯氏定氮法测定的是所有含有氨基的物质。由于这个溶液我已经用0.22um孔径的滤膜处理，所以应该是没有大的不溶物了。于是凯氏定氮法测定出来的物质我猜测是不是氨基酸和多肽，而这些不和考马斯亮蓝反应？
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11楼2014-12-25 15:57:42
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恒河夕阳梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zj风之子 at 2014-12-23 13:31:11
醇溶蛋白不溶于水。。可溶于50%~90%的乙醇溶液，你测量到的蛋白质是玉米中能够溶于水的那部分可溶性蛋白。资料很多，书籍、文献都有，具体的你可以到网上搜一下关于蛋白质方面的资料。...

可以这些玉米浸泡水也都经过了膜过滤，孔径不清楚，但是大分子基本被截留。我用0.22孔径的膜也过滤过了，然后进行的参数测量。居然含氮量很高，蛋白质浓度很低。所以比较好奇。。
看来我只能再去找找文献了，之前看的文献还不吻合。
谢谢哈！
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12楼2014-12-30 08:34:06
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zj风之子

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
含氮量很高这个是不是你实验操作有些问题，可以重复一下实验，不用客气。
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无
13楼2014-12-30 21:35:27
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meetogo

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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3楼: Originally posted by 恒河夕阳梦 at 2014-12-17 15:56:41
这个我也清楚。首先其中的无机氮也是很少的，总氮太高。浸泡水其中非蛋白氮应该也不多。所以我在想是不是其中大部分是小肽或者氨基酸？不然考马斯亮蓝法检测出蛋白质含量这么少？...

你测定的是浸泡液？奇怪。。。考马斯亮蓝法测的结果平行性好吗？
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14楼2014-12-31 06:03:57
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恒河夕阳梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by meetogo at 2014-12-31 06:03:57
你测定的是浸泡液？奇怪。。。考马斯亮蓝法测的结果平行性好吗？...

还可以。三个结果都是很低的。
确定是浸泡液，不过经过膜过滤处理过了
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15楼2015-01-06 15:42:45
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恒河夕阳梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by zj风之子 at 2014-12-30 21:35:27
含氮量很高这个是不是你实验操作有些问题，可以重复一下实验，不用客气。

这个我也测量了好多次，的确是很高，好不可思议。
同时我用有机溶剂和盐处理，能够析出好多沉淀。
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16楼2015-01-06 15:43:31
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