24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 230  |  回复: 5
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 shgd103 的 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

shgd103

[交流] IPTG诱导产酶

木聚糖酶在大肠杆菌BL21中通过IPTG诱导表达,最好采用什么温度,和什么转速?诱导时间?请虫友帮忙!!!!谢谢!!!
[search]诱导[/search]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

我曾经低到18度,结果还是表达了大量的目的蛋白,活性也还不错,可以诱导200ml,隔一段时间取一次样,然后电泳分析,观察最适时间。
金币是赌出来的
5楼2008-05-26 09:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★ ★ ★ ★
lixiaoyi1981(金币+4,VIP+0):呵呵,不错,既有理论也有自己的经验,值得鼓励。谢谢
通常为了保证表达出来的蛋白具有活性而不是以包涵体的状态出现都采用低温长时间进行诱导表达,温度高则表达的量大切快,然而容易出现大量的包涵体,如果降低温度则会增加有活性的蛋白的产量。具体情况需要具体分析,没有做过这个实验的人也不会了解具体的情况。建议做一系列表达实验进行比较分析,选出最合适的方法。

一般超声破碎细菌后,高速离心,上清中表达的蛋白基本是有活性的,而沉淀中蛋白则是包涵体通常活性很低。这一点可以通过SDS-PAGE观察。
金币是赌出来的
2楼2008-05-23 15:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shgd103

那温度最低大概到多少度???时间呢???
3楼2008-05-24 23:21:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民

铜虫 (小有名气)

温度26度,时间一般10到12小时
4楼2008-05-25 19:52:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 数一英一271专硕(085401)求调剂,可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +3 nhj_ 2026-03-25 3/150 2026-03-28 13:24 by Iveryant
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 283求调剂(080500) +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见