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970494487木虫 (正式写手)
有个锤子的锤子
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弱弱的问一下大孔树脂上样问题 已有1人参与
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本科生第一次接触大孔树脂，一直没看懂文献上说的，把样品溶于水以后上样（若吸附不完全重复上样），这个的意思是上样的时候，下面把阀打开？那柱子不会干了吗？ 要是样品水溶性不好，用低浓度乙醇溶解后上样，再用水冲掉水溶性杂质，这会把样品冲掉吗？求大神啊～～ [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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970494487: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2014-12-14 15:09:55
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大孔树脂柱，一般来说洗脱剂为乙醇-水梯度洗脱，极性从大到小一般设立洗脱剂的梯度为纯水，30%乙醇-水，60%乙醇-水，95%乙醇-水。所谓重复上样指的是，首先你尽量用水溶解样品，在上样前或者抽滤或者离心，将上清液上于大孔树脂柱上然后以水洗脱3~5个柱体积，然后讲上一步的离心后的沉淀以30%乙醇溶解，离心，继续将上清液上柱子，洗脱。依次重复直到最后。 一般来说你也可以用尽量少量的低浓度乙醇溶解样品，上样然后用用水冲掉杂质。依据大孔树脂的一般原理（吸附，分子筛），少量的乙醇上样不会影响第一个梯度也即是水的极性。所以不用担心会讲样品冲出来。 建议重复上样。另外，上样的时候请将柱子打开~~~~ 祝好运！  |
2楼2014-12-14 14:37:23
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再弱弱的问一句，这个湿法上样和硅胶湿法上样一样吗？直接溶解上样，待液面基本和树脂平行后，水洗再醇洗？3楼2014-12-14 15:09:47
4楼2014-12-14 19:49:50
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5楼2014-12-14 19:58:08
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