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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我的pcr电泳结果怎么是这样，求大神指导
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mtyx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你的PCR产物不纯啊，掺了杂质，可以纯化一下试试
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11楼2014-12-13 10:28:21
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fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
循环数是多少？有可能是你循环数太多了，减少5-10个循环试一下
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12楼2014-12-13 13:43:32
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带锁的季节

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是引物反复冻融啦，换管引物试试
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13楼2014-12-13 18:24:06
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xuebuhuai

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozake(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-14 08:57:13
条带拖尾，弥散，说明，目的基因没有得到特异性的扩增，可以考虑引物特异性不强，但因为以前能特异性的扩增出来所以，引物可以排除，所以只能考虑扩增体系（酶，模板等是不是被污染）和PCR扩增设置是不是与原来的有差异，最后祝你好运
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14楼2014-12-13 22:03:23
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自嗨_sea

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先确定别人提供的模板有无问题，如果是gDNA可以试下用其他已知引物试下能扩出东西不。模板没问题就确定引物特异性和引物是否降解。再就是确定酶mix有没问题，试扩其他pcr来确定。看图应该是模板有问题，或者特异性不好吧。

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15楼2014-12-14 09:57:51
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by laozake at 2014-12-12 15:07:13
这些我都试过了，还是不行啊...

换个提取的试剂盒吧，或者叫别人做一次，有可能操作问题

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16楼2014-12-14 11:18:39
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再闹不给糖

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

touch down效果也不一定好，建议你先跑梯度吧，分别做浓度梯度和温度梯度试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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天空没有留下翅膀的痕迹，我却从中飞过
17楼2014-12-15 14:37:49
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