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mtyx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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是不是你的PCR产物不纯啊,掺了杂质,可以纯化一下试试
11楼2014-12-13 10:28:21
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fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
循环数是多少?有可能是你循环数太多了,减少5-10个循环试一下
12楼2014-12-13 13:43:32
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带锁的季节

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是引物反复冻融啦,换管引物试试
13楼2014-12-13 18:24:06
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xuebuhuai

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozake(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-14 08:57:13
条带拖尾,弥散,说明,目的基因没有得到特异性的扩增,可以考虑引物特异性不强,但因为以前能特异性的扩增出来所以,引物可以排除,所以只能考虑扩增体系(酶,模板等是不是被污染)和PCR扩增设置是不是与原来的有差异,最后祝你好运
14楼2014-12-13 22:03:23
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自嗨_sea

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先确定别人提供的模板有无问题,如果是gDNA可以试下用其他已知引物试下能扩出东西不。模板没问题就确定引物特异性和引物是否降解。再就是确定酶mix有没问题,试扩其他pcr来确定。看图应该是模板有问题,或者特异性不好吧。

[ 发自小木虫客户端 ]
15楼2014-12-14 09:57:51
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by laozake at 2014-12-12 15:07:13
这些我都试过了,还是不行啊...

换个提取的试剂盒吧,或者叫别人做一次,有可能操作问题

[ 发自小木虫客户端 ]
16楼2014-12-14 11:18:39
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再闹不给糖

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

touch down效果也不一定好,建议你先跑梯度吧,分别做浓度梯度和温度梯度试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
天空没有留下翅膀的痕迹,我却从中飞过
17楼2014-12-15 14:37:49
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