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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我的pcr电泳结果怎么是这样，求大神指导
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laozake

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我的pcr电泳结果怎么是这样，求大神指导 已有9人参与

怎么改进啊？已经这样好久了，这还有点条带，很多时候都是整个泳道是亮的，以前可以P出来，效果很好，突然就这样了，求大神，前辈们指导啊！！！！！

我的pcr电泳结果怎么是这样，求大神指导
360截图.jpg
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1楼 2014-12-12 13:56:16
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自嗨_sea

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先确定别人提供的模板有无问题，如果是gDNA可以试下用其他已知引物试下能扩出东西不。模板没问题就确定引物特异性和引物是否降解。再就是确定酶mix有没问题，试扩其他pcr来确定。看图应该是模板有问题，或者特异性不好吧。

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15楼2014-12-14 09:57:51
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozake: 金币+2 2014-12-12 15:06:43
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-12 18:45:46
首先，你先测下DNA质量，
其次，你点个marker看看胶是否有问题，
第三，调整DNA和引物的比例。

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2楼2014-12-12 14:17:54
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-12-12 14:17:54
首先，你先测下DNA质量，
其次，你点个marker看看胶是否有问题，
第三，调整DNA和引物的比例。

如果是引物特异性不好，可以做个slowdown或者touchdown试试！

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3楼2014-12-12 14:19:13
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稻稻

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-12 18:45:57
Marker一定要点，因为它可以用来排除是否是电泳，比如胶不均匀，电压，缓冲液等存在问题。以前可以P出来说明引物及反应程序也没问题，那你就要检测是不是模板，dntp,酶哪个出了问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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做一个不动声色的人，不准情绪化，不准回头看。
4楼2014-12-12 14:50:19
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查看全部 17 个回答
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