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iiinf

银虫 (小有名气)

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[交流] 摇菌摇不出来！！！

“摇菌毫无成功率可言。和实验室的其他人用一样的菌种，只是筛选条件不一样。最近三个月开始，摇菌很少能成功。而且不管摇出的还是摇不出的，操作都是一样的，所用培养基仪器也是一样的，毫无规律的一会能出，一会出不来。实验室师兄师姐偶尔帮忙做了几次，也是偶尔能摇出来，而且用他们摇出来同一批配的培养基什么的重复实验，结果又摇不出。应该不是操作上的原因。实验毫无重复性可言，令人相当的痛苦！请高手指点分析下，还有可能是哪方面的原因？？？谢谢”

此外，酶切鉴定过的质粒进行转化，挑斑有时也不能摇起来，但有时又能摇起来。别人也做过，重复性不好。很奇怪。

[ Last edited by iiinf on 2008-5-22 at 23:32 ]

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1楼 2008-05-22 15:54:55

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未来

银虫 (小有名气)

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专业: 环境污染化学

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iiinf(金币+1,VIP+0): 5-11 13:42
iiinf(金币+1,VIP+0): 5-11 13:42

这个问题很复杂，具我分析一下有以下几个因素你可以去考虑。
1.菌种本身的问题。菌所具有的特性是否稳定，菌的代数（是不是经过很多次传代，菌种退化了）。还有就是接种量的问题，如果是从平板上挑的就没什么多大的区别。
2.摇菌的时间。一般来说，咱们都是过夜摇菌培养，但是我在白天培养过一次，发现在前8个小时都没什么变化，培养基很透明；但是到了10个小时以后，很浑浊。也就是说，你可以延长摇菌的时间再看看结果如何。
3.你加入的筛选的物质选择是否合理，浓度是否合理。你可以降低浓度再试试。
4.培养基的问题。我不知道你用的是什么培养基，但是你可以用蒸馏水代替；还有就是PH的问题，你首先根据文献来做，其次调整再试试。