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关于DNA ladder检测试剂盒 求助 已有1人参与
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| 我正在做水稻悬浮细胞细胞凋亡检测，之前用手提总是提不出来，想买碧云天的dna ladder抽提试剂盒，但说明书上写的是做动物细胞的，有没有人用这个试剂盒提过植物细胞ladder？水稻的更好，效果怎么样啊？非常感谢！！ |
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2楼2014-12-12 09:10:24
lanhongxia
铁虫 (初入文坛)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
cuijing0529(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-12-12 20:22:51
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cuijing0529(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-12-12 20:22:51
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碧云天的细胞凋亡-DNA ladder抽提试剂盒有两款，有一个是写的提取动物细胞的，另一个是可以提取植物细胞的，这个是他的说明书 使用说明： 1.样品收集 a)对于组织样品： 切下组织，并剪切成小块，置液氮中冻结，研碎或捣碎。或直接冰浴上匀浆。 b)对于贴壁细胞： 胰酶消化后，PBS或生理盐水洗一次，1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。 c)对于悬浮细胞： 1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。 2.DNA ladder抽提 a)每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混匀。 b)对于上述收集好的样品，每5毫克组织或者106个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液， Vortex混匀，充分裂解组织或细胞。 c)50℃水浴消化过夜(通常12-20小时皆可)。 d)加入500微升Tris平衡苯酚。 e)Vortex剧烈混匀，使有机相和水相充分混合，以达到抽提效果。4℃，12,000g离心5分钟。 f)缓慢吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提 一次(同步骤e)。 |
3楼2014-12-12 11:44:05