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木虫 (小有名气)

[求助] 氯霉素同源双交换

1.带50bp同源臂的目的基因上下游1000bp和质粒同源重组,酶切,线线重组验证成功。
2.用pkd3菌株P带50bp同源臂的氯霉素基因和上一步构建的质粒同源重组,替换目的基因。同样酶切线线重组。可是替换不成功。
做了好久了了。不知道问题出在哪里了。哪位大侠指导一下,不胜感激。
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Thesungoesdown,thestarscomeout,myuniversewillneverbethesame
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