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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于质粒双酶切
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cckk_2000

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by liuwukang at 2014-12-08 18:35:48
takara的酶，双酶切，在表上查到的双酶切buffer对应的两种酶活性都不怎么样，所以很捉鸡啊
...

如果两种酶buffer不一样，也好办，先单酶切，切胶回收，在进行另一个酶切，纯化即可。
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科研炮灰
11楼2014-12-09 08:57:55
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liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-12-09 08:57:55
如果两种酶buffer不一样，也好办，先单酶切，切胶回收，在进行另一个酶切，纯化即可。...

嗯，正准备尝试这种方法

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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12楼2014-12-09 09:22:45
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gangnoon

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by liuwukang at 2014-12-08 18:35:48
takara的酶，双酶切，在表上查到的双酶切buffer对应的两种酶活性都不怎么样，所以很捉鸡啊
...

takara可以查双酶切效率么？我们用的NEB,要不你可以试下。它的buffer是可以选择的，酶有HF。

[ 发自小木虫客户端 ]
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13楼2014-12-09 13:04:46
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五维度的爱

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
酶切过夜完全可以，酶切时我们一般放在37℃培养箱
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14楼2014-12-10 10:12:46
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liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 五维度的爱 at 2014-12-10 10:12:46
酶切过夜完全可以，酶切时我们一般放在37℃培养箱

哇，有水浴，有放PCR，还有培养箱，果真百花齐放

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼2014-12-10 12:12:15
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
可以用恒温烘箱
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16楼2014-12-10 17:27:30
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