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散仙孔乙己新虫 (小有名气)
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怎样用HPLC法测盐溶性蛋白的疏水性
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| 之前实验室测蛋白质疏水性都是采用ANS荧光探针法，我本来也打算继续用这个方法，但是最后看了文献之后想试着用HPLC 法测定蛋白质疏水性，柱子是Symmetry-C18，蛋白样品浓度0.5g/mL，采用水和甲醇为流动相，按照出峰时间来判定蛋白质疏水程度。但是我师弟在做预实验的时候发现纯化后经真空冷冻干燥的盐溶性蛋白无法用蒸馏水完全溶解，自然也就不知道溶液中蛋白质的浓度，虽然最后液相出来后是有主峰的，就是不知道这样对蛋白疏水性变化分析会不会有影响？另外问一下这个蛋白可以用盐溶液溶解后再进行液相吗？ |
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