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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 转基因拟南芥T0代种子筛选？？？
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hongchenlyan

金虫 (小有名气)

[交流] 转基因拟南芥T0代种子筛选？？？

T0代种子在附加抗生素的平板上筛选时，都能发芽变绿，只是生长速度慢。无语中.....
但是一般Protocal上都是写：转成功的会变绿，而不成功的种子则发黄，不能生长。
请做过筛选有经验的兄弟姐妹们指教！非常感谢！
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1楼 2008-05-20 08:31:21
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jerome711

银虫 (小有名气)
兄台是不是用的浓度不合适？我做过拟南芥抗生素筛选，没有抗性的的确是发黄不生长。改变抗生素浓度试试。
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做懂得生活的人
2楼2008-05-20 09:16:01
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hongchenlyan

金虫 (小有名气)
谢谢！我用的卡那浓度是参照一般Protocal的，50ug/ml, 需要浓度更大一些吗？
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3楼2008-05-20 10:35:05
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jerome711

银虫 (小有名气)
我用的也是这个浓度，你可以再找点别的非抗种试试。配制培养基时注意家抗生素的条件。培养基不要太热了，可以放在５０度烘箱保温，温度恒定了再加抗生素。另外抗生素质量应该没问题吧？
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做懂得生活的人
4楼2008-05-20 10:55:30
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hongchenlyan

金虫 (小有名气)
谢谢！
正准备重新配置抗生素。
另，问一下一般在培养基中生长几天后就可以移到土壤基质中？
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5楼2008-05-21 10:52:20
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wency

待两片子叶完全展开就可以移植了.
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6楼2008-05-22 00:10:42
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wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种
要看你用的是什么抗生素.不同的抗生素的筛选结果不同.
卡那霉素是使未转基因的幼苗变黄.
潮霉素筛选只有生长速度的差异.
其它的抗生素效果也不同.
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7楼2008-05-22 09:15:57
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hongchenlyan

金虫 (小有名气)
谢谢！
用的pBI121载体，是卡那霉素。
其生长过程是否也就是种子能发芽，只是幼苗慢慢会变黄？
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8楼2008-05-22 10:54:41
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