应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR引物二聚体很多
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 4285  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

虫儿飞不飞

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by liuwukang at 2014-12-05 19:30:52
循环35个，应该这个不成问题，一直是35
...

我都是30个循环的，为什么那么多？ 引物浓度有关系，把目的条带变亮，有引物二聚体也没事
赞一下 回复此楼
朝闻道，吃酸粥
11楼2014-12-07 09:27:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by oO晶锅Oo at 2014-12-07 01:04:18
模板浓度低，扩增时大量引物无模板可贴付，可以引起引物二聚体产物的产生，建议减少引物浓度或加入DMSO或二者一起用，如果还不能解决问题，建议做巢式PCR，专门针对引物浓度不够的问题设计的PCR方法。

现在模板浓度问题已经解决，也尝试了减少引物的使用量，但仍然没什么改善

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
12楼2014-12-07 12:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jcj723

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以试一下换个酶，我之前也是这样，换成TAKARA的PrimeSTAR酶后就好了，没有引物二聚体，目的条带很亮

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
13楼2014-12-07 12:47:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oO晶锅Oo

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by oO晶锅Oo at 2014-12-07 01:04:18
模板浓度低，扩增时大量引物无模板可贴付，可以引起引物二聚体产物的产生，建议减少引物浓度或加入DMSO或二者一起用，如果还不能解决问题，建议做巢式PCR，专门针对引物浓度不够的问题设计的PCR方法。

抱歉，最后一句打错一个字，应该是：专门针对底物（也就是模板）浓度不够的问题设计的PCR方法。
赞一下 回复此楼
14楼2014-12-07 23:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oO晶锅Oo

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by oO晶锅Oo at 2014-12-07 01:04:18
模板浓度低，扩增时大量引物无模板可贴付，可以引起引物二聚体产物的产生，建议减少引物浓度或加入DMSO或二者一起用，如果还不能解决问题，建议做巢式PCR，专门针对引物浓度不够的问题设计的PCR方法。

抱歉打错字了，应该是：巢式PCR是专门针对底物（也就是模板）浓度不够的问题设计的PCR方法。
赞一下 回复此楼
15楼2014-12-07 23:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

da芋头问

木虫 (正式写手)
啦啦啦啦啦(≧▽≦)

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
16楼2014-12-08 07:02:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木sigh

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主可以换一种酶试试，特异性强些，我们实验室用的诺唯赞的酶，跑PCR效果很好，目的条带很亮。
赞一下 回复此楼
17楼2014-12-10 14:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼舞流苏

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 树在田野 at 2014-12-06 14:03:26
1od引物稀释2500倍试下，引物用前用前煮沸

你的方法我试了  但是效果不大好。
赞一下 回复此楼
18楼2015-03-09 15:59:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

树在田野

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2015-03-09 15:59:28
你的方法我试了  但是效果不大好。...

还能看到引物二聚体么，能p出来么

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
好好学习
19楼2015-03-10 12:31:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月问你哦

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by IC夏天 at 2014-12-05 21:51:47
我的全是二聚体，都想shi了。老师坚决称引物没问题，各种控制变量。。好想知道有目的条带的感觉~~

哈哈哈哈，我们是只要出现问题就换酶，热启动酶，长扩增高保真酶，超保真酶，肯定能成功，因为我们相信我们的引物模板是好的
赞一下 回复此楼
我就是我，是不一样的烟火
20楼2015-03-10 17:19:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuwukang 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:35 by 沐霖12138
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭