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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jerome711

银虫 (小有名气)

[交流] 请教菌液PCR的做法!哪位高手知道

请教菌液PCR的做法!哪位高手知道
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做懂得生活的人
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mark32280667806


reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
最好是单菌落,不用菌液为佳!!!
3楼2008-05-20 23:59:50
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flesymgo

金虫 (小有名气)

reasonspare(金币+0,VIP+0):thx
这个很简单啊,就是把你平常做PCR用的模板DNA换成菌液就行了,其它条件不变.
我本科毕设的时候做过.
做现在能做的,想现在该想的.
2楼2008-05-19 18:37:53
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

取0.5-1ml菌液离心收集菌体,弃上清,加入100-200ul灭菌超纯水重悬菌体,置沸水浴10min,离心沉淀菌体。取上清即可作为PCR模板。(对于转化后质粒检测可用;对于基因组DNA没有试过,不过直接以菌体作为模板倒是可以。)
金币是赌出来的
4楼2008-05-21 09:48:20
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phyllislhy

木虫 (正式写手)

预变性时95度5分钟,其余和正常PCR一样,只不过把DNA换成菌液,我一般加2微升。
5楼2008-05-21 10:55:27
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