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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教菌液ＰＣＲ的做法！哪位高手知道
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jerome711

银虫 (小有名气)

[交流] 请教菌液ＰＣＲ的做法！哪位高手知道

请教菌液ＰＣＲ的做法！哪位高手知道
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做懂得生活的人
1楼 2008-05-19 17:32:58
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flesymgo

金虫 (小有名气)
reasonspare(金币+0,VIP+0):thx
这个很简单啊,就是把你平常做PCR用的模板DNA换成菌液就行了,其它条件不变.
我本科毕设的时候做过.
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做现在能做的,想现在该想的.
2楼2008-05-19 18:37:53
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mark32280667806

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
最好是单菌落，不用菌液为佳！！！
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3楼2008-05-20 23:59:50
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
取0.5-1ml菌液离心收集菌体，弃上清，加入100-200ul灭菌超纯水重悬菌体，置沸水浴10min，离心沉淀菌体。取上清即可作为PCR模板。（对于转化后质粒检测可用；对于基因组DNA没有试过，不过直接以菌体作为模板倒是可以。）
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金币是赌出来的
4楼2008-05-21 09:48:20
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phyllislhy

木虫 (正式写手)
预变性时95度5分钟，其余和正常PCR一样，只不过把DNA换成菌液，我一般加2微升。
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5楼2008-05-21 10:55:27
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威风之狼

金虫 (小有名气)
菌液或挑的单菌落都可直接做模板
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6楼2008-05-22 10:28:12
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十比

木虫 (著名写手)
直接挑菌落，不用另煮，用平常的PCR程序就行啦。
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7楼2008-05-22 21:18:10
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