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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 测定CYP酶活性时为什么底物浓度一定要选在Km值附近，不能理解，求解。
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cc包啊

银虫 (小有名气)

[交流] 测定CYP酶活性时为什么底物浓度一定要选在Km值附近，不能理解，求解。 已有1人参与

如题，为什么一定要选在Km值附近呢。为什么不能只要在平台期之前就行？有什么优势吗？鉴于每次问问题都没人回答，这回就发10个，免得浪费。。。。。签到不容易啊
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1楼 2014-12-01 20:52:51
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cc包啊

银虫 (小有名气)
为什么为什么为什么为什么，我问的问题永远没有人回答，为什么为什么为什么为什么
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2楼2014-12-01 22:15:10
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wansenhe

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Km值附的曲线可看成近似于直线的线性关系，测量时的误差最小。
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3楼2014-12-04 03:49:34
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wansenhe

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Km值附近的曲线可看成近似于直线的线性关系，测量时的误差最小。
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4楼2014-12-04 03:52:04
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wansenhe

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cc包啊: 金币+10, 谢谢 2015-03-17 20:45:55
Km值附的曲线可看成近似于直线的线性关系，测量时的误差最小。
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5楼2014-12-05 01:22:21
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aboylikeu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我最近也在纠结这个问题，我觉得如果单纯只是测活性的话，选在平台时的浓度使反应以最大速率进行更能代表酶的活性。 但是我在做药物对CYP酶的抑制，其探针底物为什么选在Km附近，我就不清楚了，请问你现在有答案了吗？？
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6楼2016-03-07 09:36:39
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aboylikeu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最近看到的文献这段可能是一个比较好的解释吧：concentrationsDuring the selection of CYP probe reactions, special care shouldbe taken with the substrate concentrations. In fact, it is possible thatmultiple CYP isoforms will be able to catalyze the same metabolictransformation if the substrate concentration is inappropriate and,in this case, the measured CYP activity via metabolite formationcould not reflect that of the presumed CYP. For this reason, select-ing a substrate concentration at or below the Michaelis–Mentenconstant (Km) established for the test system is recommended toactivate mainly the considered CYP pathway and maintain highselectivity. In addition, the measured enzyme-substrate affinitydata provides information on the validity of the enzyme sourceand experimental conditions because the Kmvalues should besimilar regardless of the enzyme source [33].-----ReviewA 【cocktail approach for assessing the in vitro activity of humancytochrome P450s: An overview of current methodologies 】文献名贴在这里 好帮助以后有同样疑问的人
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7楼2016-03-08 16:44:54
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