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艾清

银虫 (小有名气)

[求助] 多糖纯化过程活性丢失,怎么回事呀,大家有懂的帮帮我吧 已有3人参与

粗多糖有抗炎活性,以水、不同浓度NaCL以及碱过了DEAE纤维柱后,活性在任何部位都没有检测到,这是怎么回事啊?
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
艾清: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢您,希望能继续得到您的帮助 2014-11-28 17:30:19
你的粗多糖里面有其他非多糖杂质吧
2楼2014-11-28 17:09:27
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普通回帖

艾清

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by torekill at 2014-11-28 17:09:27
你的粗多糖里面有其他非多糖杂质吧

谢谢您的回答。粗多糖用3500透析袋除小分子后还有活性。过纤维柱后因为要除NaCL,用10000的玻璃纸透析后活性消失了。

3500透析袋应该把小分子杂质除掉了吧,请教您其他杂质还会有什么呢
3楼2014-11-28 17:29:08
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
艾清: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-29 12:49:32
会不会是纤维素柱上还有没有没有冲下来的组分?
4楼2014-11-28 17:35:33
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艾清

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by torekill at 2014-11-28 17:35:33
会不会是纤维素柱上还有没有没有冲下来的组分?

我用水,0.2,  0.4,  0.6,  0.8,  1.0,  1.5,  2.0NaCL还有0.5的碱都冲了,而且每个都冲了两倍柱体积,还会有没冲下来的吗?
不过由于我晚上也没停恒流泵,流速调的比较慢,流速会不会影响呢?
5楼2014-11-28 17:54:25
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pjn403403

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
艾清: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-29 14:54:58
是不是浓度不够的问题?
从事中药相关工作,希望和大家多交流
6楼2014-11-29 14:47:38
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艾清

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by pjn403403 at 2014-11-29 14:47:38
是不是浓度不够的问题?

我测粗多糖时用的是400ug/ml,过纤维柱后部位多糖还是用的这个浓度,太低了吗
7楼2014-11-29 14:54:42
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pjn403403

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 艾清 at 2014-11-29 14:54:42
我测粗多糖时用的是400ug/ml,过纤维柱后部位多糖还是用的这个浓度,太低了吗...

过完柱子你测了各个部位多糖的纯度吗?你做的体内还是体外实验?
从事中药相关工作,希望和大家多交流
8楼2014-11-29 15:09:17
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剑客

木虫 (知名作家)

确定不是多糖以外的物质具有的活性???
9楼2014-11-29 17:08:02
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艾清

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by pjn403403 at 2014-11-29 15:09:17
过完柱子你测了各个部位多糖的纯度吗?你做的体内还是体外实验?...

我做的体外,本来我的想法是先找到活性部位,即使含一些蛋白也没关系,所以没有测多糖纯度。从DEAE柱子过下来除了蛋白和多糖还会有其他物质吗?
10楼2014-11-29 18:05:59
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