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celia2012

铜虫 (小有名气)

[求助] 硫化氢 亚甲基蓝分光光度法 斜率偏低

标液是购买的,新打开的,最后标液浓度 5μg/ml
标液吸取量(ml) 0.00 ,0.10,  0.20, 0.40 , 0.60 , 0.80 , 1.00  用的1ml移液管
吸收液(ml)       10.00,9.90, 9.80,  9.60 ,9.40,  9.20, 9.00
加1ml混合显色剂(1ml对氨基二甲基苯胺使用液和一滴三氯化铁混合)
加盖,倒转混匀,放置30min
加一滴磷酸氢二安溶液,排除Fe3+颜色,混匀(是不是加一滴不够,颜色干扰了)
665nm,2cm比色皿
结果:(ml)     KB1 ,  KB2,     0.10,      0.20,    0.40,   0.60,    0.80,   1.00
             ABS 0.060   0.060     0.123    0.189    0.325  0.456  0.563   0.640
最后两个点的吸光度明显偏低,删除后两个点,线性很好,斜率偏低,就只有0.132这样,达不到标准
纠结中,不知道哪个环节出问题了,还有哪位虫友遇到这样的问题,本人第一次接触这个~
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