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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 杂交瘤细胞融合时长菌了 求解
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wys476488620

金虫 (正式写手)

[求助] 杂交瘤细胞融合时长菌了 求解 已有1人参与

2次细胞融合后 加HAT第3天发现有细菌长出。  用的试剂都已确认是无菌的  SP2/0也没有感染菌 。
后又无菌环境下取小鼠脾细胞，用HAT培养。3天后发现长菌。然后我做了细菌鉴定。 结果此菌为贪铜菌。
（ps1：对照用普通培养基目前肉眼无法观察到，但不排除没有）
（ps2：小鼠脾细胞培养我做了两次实验用的是实验室不同批次的老鼠，说明不是个别现象）
求解1：小鼠为什么会感染贪铜菌，你们遇到过吗？
求解2：如果不是感染的，那这个细菌是怎么长出来的？
求解3：这个细菌危害性有多强？怎么去除？
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踏踏实实的就行了
1楼 2014-11-27 16:10:21
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hutingting

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wys476488620 at 2014-12-19 10:58:36
嗯 有用 我手术器材都是当天灭菌，用的时候手术器材会用酒精擦拭并灼烧一段时间再用。老鼠猝死后用75%酒精侵泡10min。其它的如滤膜、注射器等都是一次性的。脾脏是用10×的双抗。最令人费解的污染的菌是贪铜菌属。 ...

楼主，你的这个污染后来找到原因了吗
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4楼2020-03-12 13:48:10
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livein合肥

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
wys476488620: 金币+6, ★有帮助 2014-12-19 10:58:56
小鼠体内或者说脾脏感染细菌的可能性不大，在实验操作过程中污染的可能性较大，如果所有试剂都可以确认无菌的情况下，建议重新灭菌手术器材，同时在分离脾脏后将脾脏在5×抗生素中漂洗。另外，重新测试所用试剂（主要是基础培养基和血清）有没有染菌情况。
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2楼2014-12-18 14:39:19
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wys476488620

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by livein合肥 at 2014-12-18 14:39:19
小鼠体内或者说脾脏感染细菌的可能性不大，在实验操作过程中污染的可能性较大，如果所有试剂都可以确认无菌的情况下，建议重新灭菌手术器材，同时在分离脾脏后将脾脏在5×抗生素中漂洗。另外，重新测试所用试剂（主 ...

嗯 有用 我手术器材都是当天灭菌，用的时候手术器材会用酒精擦拭并灼烧一段时间再用。老鼠猝死后用75%酒精侵泡10min。其它的如滤膜、注射器等都是一次性的。脾脏是用10×的双抗。最令人费解的污染的菌是贪铜菌属。我们研究所没用一个实验室涉及到这类菌，以前也没听说过有这类菌污染细胞的例子。
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踏踏实实的就行了
3楼2014-12-19 10:58:36
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