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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 制备感受爱为什么用氯化钙而不用其他的钙盐？
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87115wh

木虫 (小有名气)

七吃喀嚓

[求助] 制备感受爱为什么用氯化钙而不用其他的钙盐？ 已有5人参与

钙离子可以增强细胞膜的通透性，那么为什么制备感受态用的都是氯化钙而不用其他钙盐呢？
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老妹，你说这是为什么呢
1楼 2014-11-27 08:14:50
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
87115wh(myprayer代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-27 14:03:47
钙离子的作用是结合于细胞膜上，是细胞膜呈现一种液晶态。在冷热变化刺激下液晶态的细胞膜表面会产生裂隙，使外源DNA进入。
另附原理，仔细看看吧！
原理：
目前，感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备，即用低渗CaCl2溶液在低温（0℃）时处理快速生长的细菌，从而获得感受态细菌。此时细菌膨胀成球形，外源DNA分子在此条件下易形成抗DNA酶的羟基－钙磷酸复合物粘附在细菌表面，通过热激作用促进细胞对DNA的吸收。转化效率可达106－107转化子/微克DNA。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-11-27 09:05:50
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
87115wh: 金币+5, ★★★很有帮助, 恩，我觉得貌似也是这个原因，但是有没有其他因素呢？ 2014-11-27 10:27:21
硫酸钙溶解性不好吧，低温条件是不是会产生沉淀。

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3楼2014-11-27 10:21:01
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87115wh

木虫 (小有名气)

七吃喀嚓
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-11-27 09:05:50
钙离子的作用是结合于细胞膜上，是细胞膜呈现一种液晶态。在冷热变化刺激下液晶态的细胞膜表面会产生裂隙，使外源DNA进入。
另附原理，仔细看看吧！
原理：
目前，感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方 ...

这是氯化钙法的原理，我的问题是，为什么都用氯化钙而不用其他的钙盐提供钙离子？
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老妹，你说这是为什么呢
4楼2014-11-27 10:26:40
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
87115wh(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-27 14:04:00
其他可能猜测的比较多了，一般氯离子泵入胞内就是维持渗透压，基本不会被转化成其他价位的氯离子，其他离子如硫酸盐，磷酸盐等都会被代谢。也许其他有的离子也可以甚至效果更好，只是没人一一去试，毕竟转化效率已经不错，不会再有数量级提高。

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5楼2014-11-27 10:36:36
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gangouyang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是前辈们试过了的，氯化钙是最佳的。就好像，做转染的时候是用磷酸钙法是一样的。
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6楼2014-11-29 22:33:19
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ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

胡乱解释的
从化学角度来说磷酸钙、硫酸钙、碳酸钙的溶解度不好，
磷酸二氢钙溶液呈现酸性
剩下就是硝酸钙了，硝酸根与氯离子比起来，细胞当然更喜欢cl了，毕竟生理盐水用nacl而不是nano3对巴
其实硝酸根也是有较强的氧化性，多了肯定不好。参考硝酸强氧化性酸。

最后我觉得cacl2多便宜阿，效果又好不用这个还用什么
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7楼2014-11-30 11:04:04
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sandancy123

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

氯化钙中的氯是维持细胞在一定渗透压环境中，而且氯化钙的溶解度高，当感受态细胞进行转化时，在0度时，氯化钙的低渗作用下，感受态细胞膨胀，在42度热击处理下，dna转化混合物就被吸收进去

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8楼2014-11-30 15:57:26
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