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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 融合PCR
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347710974

新虫 (初入文坛)

[求助] 融合PCR 已有2人参与

融合PCR第一次融合成功了，把融合的片段回收后作为模板，再次进行pcr，结果却扩增不出来，求大神指点迷津！这是为什么呢？？？
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1楼 2014-11-25 08:54:11
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不太清楚，但建议融合后跑胶条带合适的话，直接以PCR产物为模板，上下游引物扩增，增加产物浓度后再纯化
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你的日子如何，你的力量也必如何！
2楼2014-11-25 09:04:36
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你融合的片段是不是在回收的过程中出现断裂了？
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年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
3楼2014-11-25 12:37:34
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347710974

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-11-25 12:37:34
你融合的片段是不是在回收的过程中出现断裂了？

不知道哎。。。应该不能有这种情况吧，片段大小也就2500bp，也不是很长。。。。。。。
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4楼2014-11-25 13:38:04
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炼水燎原

新虫 (小有名气)
检查引物，降低退火试试
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trust is earned
5楼2014-11-26 19:33:07
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347710974

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2014-11-25 09:04:36
不太清楚，但建议融合后跑胶条带合适的话，直接以PCR产物为模板，上下游引物扩增，增加产物浓度后再纯化

此招试过了，可是P出来的条带还不如第一次融合的条带亮，不知道什么情况？
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6楼2014-11-27 13:21:58
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