应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物设计
292/3返回列表上一页123下一页
查看: 1827  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

utryer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by xlx906047684 at 2014-11-25 21:33:38
这么简单吗，能不能说的具体点啊，我之前学的化学，现在才开始做分子，好多还不太懂，谢谢帮忙啊...

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/
1.在引物处输入你的正向引物和反向引物，
2.Database选择你要查询的数据库
3.Organism你的物种，
然后查询，
理论上来说，结果会出了n条。看看里面有没有你所要的片断长度及实际扩出来的长度。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2014-11-26 01:03:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-27 20:06:23
哪有想的那么麻烦，这个原则，那个原则
http://www.simgene.com/Primer3
用了很多次，从排名前5的里边选靠前的，基本没问题
赞一下(1人) 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
12楼2014-11-26 09:36:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

977673882

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我感觉PCR产物的大小有多大没关系，只要这对引物把目的条带P出来就行，你们觉得呢？
赞一下 回复此楼
创造多彩的人生
13楼2014-11-26 10:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gufeng2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-27 20:06:32
Left primer is Tm too low/High end self complementarity; Right primer is Tm too low。下面引物试试看行不行：
LEFT   aaacccattcgatcgatcattagta
RIGHT  tgtggaggaaactcacaattattca
PRODUCT SIZE: 1367.
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2014-11-26 10:49:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xlx906047684: 金币+44, ★有帮助 2014-11-26 12:16:13
你扩增的基因来源和文献上一样吗？
赞一下 回复此楼
···
15楼2014-11-26 11:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xlx906047684

金虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 小冀- at 2014-11-26 11:02:08
你扩增的基因来源和文献上一样吗？

和文献上是同一种植物，但不确定种属是否一样
赞一下 回复此楼
16楼2014-11-26 12:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xlx906047684

金虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by gufeng2008 at 2014-11-26 10:49:28
Left primer is Tm too low/High end self complementarity; Right primer is Tm too low。下面引物试试看行不行：
LEFT   aaacccattcgatcgatcattagta
RIGHT  tgtggaggaaactcacaattattca
PRODUCT SIZE: 1367.

不是说3端最好不是A吗（不好意思金币发完了，只能赞一下了，谢谢啊）
赞一下 回复此楼
17楼2014-11-26 12:31:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

站着别动君

新虫 (小有名气)
pcr程序设计的对么？比如退火时间？。。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
18楼2014-11-26 13:55:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gufeng2008

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by xlx906047684 at 2014-11-26 12:31:42
不是说3端最好不是A吗（不好意思金币发完了，只能赞一下了，谢谢啊）...

有这原则，但主要看引物和多聚酶的亲和力，你的序列GC含量高，所以PCR条件要选用高GC的。
赞一下 回复此楼
19楼2014-11-26 14:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xlx906047684

金虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 站着别动君 at 2014-11-26 13:55:10
pcr程序设计的对么？比如退火时间？。。

退火温度和时间都调整过，还是结果都差不多
赞一下 回复此楼
20楼2014-11-26 15:10:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xlx906047684 的主题更新
292/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 04:07 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭