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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 诱导出来做的准备,师兄师姐们帮忙看看已有1人参与

蛋白诱导出来了,跑了SDS,确定大小也正确,现在做的准备
1,大量培养,离心100ml菌液,加10mlPBS超声波破碎,取上清和沉淀,加等体积的上样缓冲液 、煮沸、跑SDS确定是在沉淀中表达
2,对沉淀进行处理
3,过柱子,纯化
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踏实
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

第一步加PBS直接超声波破碎没有问题吧?不需要加裂解液和PMSF吧?
踏实
3楼2014-11-24 18:51:50
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

对沉淀进行处理,看到不同的文献方法不一样,之前没有做过,所以现在很乱
踏实
2楼2014-11-24 18:50:23
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Crystal_New

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-24 18:51:50
第一步加PBS直接超声波破碎没有问题吧?不需要加裂解液和PMSF吧?

没问题,注意要低温啊。
像长劲鹿站的高看得远,像蜗牛一样勤奋~
4楼2014-11-24 19:13:45
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Crystal_New at 2014-11-24 19:13:45
没问题,注意要低温啊。...

已经在超声波破碎了,恩恩,冰上操作
踏实
5楼2014-11-24 21:18:03
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