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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 诱导出来做的准备，师兄师姐们帮忙看看
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 诱导出来做的准备，师兄师姐们帮忙看看已有1人参与

蛋白诱导出来了，跑了SDS，确定大小也正确，现在做的准备
1，大量培养，离心100ml菌液，加10mlPBS超声波破碎，取上清和沉淀，加等体积的上样缓冲液 、煮沸、跑SDS确定是在沉淀中表达
2，对沉淀进行处理
3，过柱子，纯化
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踏实
1楼2014-11-24 18:49:43
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
对沉淀进行处理，看到不同的文献方法不一样，之前没有做过，所以现在很乱
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踏实
2楼2014-11-24 18:50:23
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
第一步加PBS直接超声波破碎没有问题吧？不需要加裂解液和PMSF吧？
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踏实
3楼2014-11-24 18:51:50
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Crystal_New

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-24 18:51:50
第一步加PBS直接超声波破碎没有问题吧？不需要加裂解液和PMSF吧？

没问题，注意要低温啊。
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像长劲鹿站的高看得远，像蜗牛一样勤奋~
4楼2014-11-24 19:13:45
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Crystal_New at 2014-11-24 19:13:45
没问题，注意要低温啊。...

已经在超声波破碎了，恩恩，冰上操作
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踏实
5楼2014-11-24 21:18:03
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