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金虫 (小有名气)

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[求助] MTT之殇？！已有1人参与

本人最近在做MTT，筛选药物的敏感株。阳性药高浓度是10ug/ml，三倍梯度稀释；样品高浓度是1000ug/ml，三倍梯度稀释，五个复孔。现在也做了五种细胞株，没株也重复了两次，但是怎么做也不能达到一下标准：①阳性药能做出浓度依赖，样品组浓度依赖性几乎没有，参差不齐，药物效果是有的，抑制率也有百分之六七十，但为何做不出浓度依赖呢？②570nm测吸光度，阴性对照无法达到0.7-1.2之间，我也才铺了3000个细胞啊？但换成490nm就符合标准了，不知道这两个吸光度有何不同？③我现在用的是Gibco的血清，这其中血清会有影响吗？我的实验设计还需要怎么改善？⑤一般大神筛敏感株要用多少株细胞啊？要做到什么程度才可以呢？这种情况都一个月了，好心烦，希望各位帮我解答。。。每个问题10金币送上，谢谢。

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