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求助：关于转化的问题
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我的实验是将不超过1kb的片断连入pGBKT7载体， 1.先对pGBKT7空质粒和1kb的片断进行双酶切，切完之后质粒变成一条带，那说明质粒应该是线性的。 2.pGBKT7质粒与1kb的片断酶连，在4度酶连过夜或是16度2小时都做过 3.然后进行转化，结果有几次都没有菌落生长出来。最近长出来几个菌落，提质粒之后进行双酶切，没有连进去的片断，只有一条与pGBKT7质粒大小相当的带（之前菌落PCR扩出来一个大小不会的片断）。 请各位帮忙看一些我的实验可能那里有问题啊？ |
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