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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么电转后筛菌，然后用通用引物PCR，但是空GS115都PCR不出条带？跪求！回复！！
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alive_fs

新虫 (初入文坛)
你用的引物是基因引物还是载体引物啊，有可能是pcr条件的问题，还有就是pcr验证的时候最好设定两个对照一个阴性一个阳性，这样子就没多大的问题了，我做GS115电转后的pcr条件一般是一单元，1个cyc95℃4min，二单元30cyc，95度1min，55度1min，72度1min，三单元1cyc，72度10min。退货温度要根据你引物的GC含量自行设计调整，还有我之前做过对照的做个pcr验证可以不用酵母裂解酶处理也可以p出来哈，
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11楼2014-11-26 10:02:47
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笨笨和傻猪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by alive_fs at 2014-11-26 10:02:47
你用的引物是基因引物还是载体引物啊，有可能是pcr条件的问题，还有就是pcr验证的时候最好设定两个对照一个阴性一个阳性，这样子就没多大的问题了，我做GS115电转后的pcr条件一般是一单元，1个cyc95℃4min，二单元3 ...

亲，好的谢谢您
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12楼2014-11-28 10:55:00
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