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guoqin_shiyin银虫 (正式写手)
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[交流]
关于T载体的疑问
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请问T载体连入片段是否有正向和逆向之分呢？ 还有就是如果用T载体连接大于2KB的片段，是否很困难，有没有什么需要注意的地方呢？谢谢 |
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5楼2008-05-12 22:33:51
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lixiaoyi1981(金币+2,VIP+0):详尽的回答，呵呵，谢谢
lixiaoyi1981(金币+2,VIP+0):详尽的回答，呵呵，谢谢
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T-vector 是指在线性载体的末端有个T的尾巴，这个尾巴在双链中成镜像关系，一般不会发生环化。 目的片段在加上了A尾巴后，和T-vecotr上的T尾巴成互补的关系；在连接酶的作用下，目的片段和载体连接。 T-vector 是有正向和反向之分，但是在连接时都不会去考虑这个问题，连接T载体一般都是用来测序的。 大于2KB时，连接的效率是比1K时低些；一般，片段越长，连接的难度越大。 T载体是比较容易连接的载体，按照说明说来做，一般没有问题的！ 可以延长连接时间，温度在16°，温度要稳定！ |
2楼2008-05-12 07:43:04
3楼2008-05-12 10:02:53
guoqin_shiyin
银虫 (正式写手)
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4楼2008-05-12 12:39:31