24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 873  |  回复: 7
当前主题已经存档。

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

[交流] 关于T载体的疑问

请问T载体连入片段是否有正向和逆向之分呢?

还有就是如果用T载体连接大于2KB的片段,是否很困难,有没有什么需要注意的地方呢?谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)

★ ★
lixiaoyi1981(金币+2,VIP+0):详尽的回答,呵呵,谢谢
T-vector 是指在线性载体的末端有个T的尾巴,这个尾巴在双链中成镜像关系,一般不会发生环化。
目的片段在加上了A尾巴后,和T-vecotr上的T尾巴成互补的关系;在连接酶的作用下,目的片段和载体连接。
T-vector 是有正向和反向之分,但是在连接时都不会去考虑这个问题,连接T载体一般都是用来测序的。
大于2KB时,连接的效率是比1K时低些;一般,片段越长,连接的难度越大。
T载体是比较容易连接的载体,按照说明说来做,一般没有问题的!
可以延长连接时间,温度在16°,温度要稳定!
2楼2008-05-12 07:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Aill237

金虫 (小有名气)

16度么...我怎么以前似乎是37连的....
每天都要进步一点
3楼2008-05-12 10:02:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

请问延长连接时间到多长时间呢?我的片段大小为2kb和2。8kb
4楼2008-05-12 12:39:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
5楼2008-05-12 22:33:51
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

我这次连接载体取了0.25微升,片段取了4.5微升,不知道够不够量呢。16度连接了3个多小时然后放在了4度过夜,不知道结果怎样,希望成功。

谢谢楼上的回答。

甚么是Cracking 方法呢
6楼2008-05-13 17:10:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

darkblue111

铜虫 (初入文坛)

16度过夜后再放四度冰箱吧
7楼2008-05-14 09:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

谢谢楼上的,按照你的方法已经成功了。
8楼2008-05-15 19:10:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guoqin_shiyin 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +11 新时代材料 2026-03-27 11/550 2026-03-28 18:09 by YK。。
[考研] 学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 16:53 by xuxiang
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +8 辰沐5211314 2026-03-26 8/400 2026-03-28 11:25 by xuxiang
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么! 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分,前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
请填处理意见